אמצעי זהירות לאלקטרופורזה של פוליאקרילאמיד

· פוליאקרילאמידג'ל חייב על ידי מונומר אקרילאמיד, חומר התחלה של פילמור, זרז, וזכות תערובת המלח והמאגר יחד.

· אקרילאמידו- BIS (n, n '- מתילן כפול אקרילאמיד) הוא מטריצת הג'ל של המונומר.

· אמוניום פרסולפט התחל תהליך פילמור דבק. ניסוח הדבק דורש 10% תמיסת אמוניום פרסולפט שהוכן במים. מרבית המידע הצביע על צורך בשימוש פעיל. עם זאת, ניתן להציב את הפיתרון של 10% על 4 ℃ במשך מספר שבועות ללא אובדן פעילות משמעותי. הכנס עד 10 מ"ל והושלך כאשר הדבק לא מצליח לצבור.

טיפ: אחוז שלאקרילאמידבדבק רצף ודבק חלבון אינו זהה. אם משתמשים באקרילאמיד מראש: פתרון BIS, הקפד לקבל את הבקבוק הנכון.

· Temed (n, n, n ', n'- tetramethyl ethylenediamine) הוא זרז, בבקבוק חום, המונח במקרר. מוסיפים רגע לפני שופכים דבק.

· יש לשטוף את האלקטרופורזה האלקטרופורזה של פוליאקרילאמיד, בהן יש לשטוף זכוכית באלקטרופורזה לפני ואחרי כל פעם. לאחר אלקטרופורזה, שוטפים במברשת רכה ובד במי סבון חמים, שוטפים במים מזוקקים ועומדים לייבוש.

· לחות ואבק עלולים לגרום לפולימר חלול. לפני האלקטרופורזה, נקה את צלחת הזכוכית עם מנקה זכוכית ונגב אותה במברשת רכה. שוטפים במים מזוקקים וייבשים היטב עם נייר נייר. שטיפה עם 70% אתנול לפני הניגוב עם נייר עוזרת לנקות ולהאיץ ייבוש. הוסף דגימות של אקרילאמיד ברציפות: BIS, מים, תמיסת חיץ, אמוניום פרסולפט, TEMED. מנערים היטב ושופכים מיד.

אין צורך להפיל את הפוליאקרילאמיד לפני הפילמור. (אקרילאמיד היה ממוקם בוואקום להסרת בועות מכיוון שחמצן מעכב פילמור.)

טיפים לדגימה של נקודת דבק אופקית.

הכניסו חתיכת נייר שחור בקופסה התחתונה, רקע שחור כדי ליצור חור לדוגמה כדי לראות בצורה ברורה יותר.
· חיץ מלא של מיכל דבק, קצת מעל הקולואיד.
· אם לקצה יש אור, הפעל את האורות, תן לאור להאיר את הקולואיד. צייר את הדגימה אל הפיפטה.
· שימוש במכשיר פיפט אוטומטי.
· ב 10-200 MU 1 ניתן להשתמש בנקודת הנעה נוזלית ברוב הנקודות במדגם. עבור חורי מדגם קטנים מאוד (פחות מ- 10μ1), ראש הפיפטה הארוך המשמש לדבק רצף נוח יותר.

· פיפטה פשוט שקועה במדגם, ושואפת נוזלים נעים לאט. הדגימה עשויה להופיע דביקה עם גליצרין, ושאיבה מהירה עשויה למשוך בועות אוויר לראש הפיפטה.

· דגימות לאחר שאיפת ראש פיפטה, יזזו את ראש הנוזל בעדינות על קצה הצינור או נייר הנייר יונק ראש נוזלי מחוץ לטיפות. היזהר לא למצוץ את הדגימה.

הכניסו את הדגימה לחור הדגימה

· מכשיר פיפט כדי לשמור על לחץ מעט, הפוך את הדגימות לזוז מעט ראש נוזלי.
· ראש הפיפטה שהוחדר למאגר, מעט גבוה יותר מחורי הספוט, שומר על לחץ חיובי. ניתן להכניס את קצה הפיפטה לחור קטן.
· לאט ובתמדה את הדגימות החוצה. קצה הפיפטה ממוקם מעל חור הדגימה של הנקודה, והדגימה תשקע בחור. תן לדגימה לשקוע כדי למלא את חור הדגימה במקום לדחוף פנימה.
· ברגע שהטיפה האחרונה של הדגימה עם ראש נוזל, נוזל יעבור לרגל השנייה, תרים לאט את מהלך הנוזל, יזוז מחוץ למאגר

כיצד לבצע דגימה אנכית של דבק?

· חורים מדגימים של נקודת דבק אנכית נוצרים בין שתי חתיכות זכוכית. בדבק דק מאוד, לא ניתן אפילו להכניס את ראש הפיפטה בין שתי צלחות זכוכית. צפו בגליצרין! הניחו את ראש הפיפטה מעל חור הדגימה והדגימה תשקע בחור.
· מדגם נקודה לפני כן, הקפד לשים את הנקודה האנכית של חור הדגימה של ג'ל אציל -ג'ל פוליפרופילן נקי. שטפו את האקרילאמיד הלא -פולימרי ואת המים שעשויים להופיע בתחתית חור הדגימה. המים יכולים להפוך את חור הדגימה לקטנים משמעותית. השתמש במזרק של 25 מ"ל או 50 מ"ל ובמחט 18 מד. שופכים פנימה את חיץ האלקטרופורזה ושטפו בזהירות את חור הדגימה.
· זה יכול להיות קשה לראות את חור הדגימה, אך באותו דבר, השאר קל. אם יש עודפי חורים, ניתן לבדוק את חיץ הדגימה עם כחול ברומופנול.